考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度实验原理

2023-03-27

考马斯亮蓝法一种快速,灵敏的检测方法,利用蛋白质染料结合原理定量测定痕量蛋白质。与其他几种方法相比,这种蛋白质测定法具有突出的优势,因此被广泛使用。该方法是目前最敏感的蛋白质检测方法。
考马斯亮蓝G-250染料与酸性溶液中的蛋白质结合,将染料的最大吸收峰的位置从465 nm更改为595 nm,溶液的颜色也从棕黑色变为了蓝色。通过测量595nm处光吸收的增加,可以知道与其结合的蛋白质的量。检测发现染料主要与碱性蛋白质有关氨基酸(特别是精氨酸)与芳香族氨基酸残基结合。